产品简介:
本产品包含高纯度 Plus Taq HiFi DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 反应的增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为 2×。Plus Taq HiFi DNA 聚合酶比普通 Taq 酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好、扩增速度快(10-15 秒 1kb)等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性 PCR 反应及 GC 含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物的 3’端附有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于 TA 载体克隆。 本产品有含蓝色染料,在 PCR 反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE 琼脂糖凝胶中与 500 bp 双链 DNA 片段相近。
产品组份:
2×plus Taq HiFi PCR mix (with blue dye) 1 ml
Nuclease-free ddH2O 1ml
适用范围:
1.基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量 PCR 实验和微量 DNA
的检测。
2.用于从复杂模板中如基因组等扩增 PCR 产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突
变的分析(SNP)等。
所需试剂:使用者仅需准备 PCR 反应的模板、引物和蒸馏水等。
【操作示例】 | |
按下表配制PCR反应体系(冰上操作): | |
Template DNA | 〈 1ug |
2×plus Tap HiFi PCR mix(with blue dye) | 10ul |
Primer 1(10uM) | 0.5ul |
Primer 2(10uM) | 0.5ul |
Nuclease-free dd H₂O | 20ul |
建议的PCR条件: | |
95℃ | 3min |
32-36 cycles of | |
94℃ | 25sec |
55-64℃ | 25sec |
72℃ | 10-15sec,/1 kb DNA |
72℃ | 5 min |
4℃ | forever |
<*模板量:10~1000 ng 基因组 DNA,1~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的
cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构
不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩
小反应体系>。