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X-gal溶液 (20mg/mL)

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产品简介:

IPTG 为安慰性诱导物,X-gal 为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG 可诱导载体Lac操纵子DNA 区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α 互补)。实现α 互补的细菌铺在含有X-gal 生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA 插入质粒的多克隆位点后可破坏α 互补作用,将产生白色菌落。

此产品为X-gal 用DMF 溶解过滤后配成的无菌溶液。


操作步骤(仅供参考):

蓝白色筛选:

(1)在100mL 的琼脂培养基中,加入500μL 的X-gal 溶液(20mg/mL)、250μL 的IPTG 溶液(50mg/mL)和100μL 的Amp 溶液(氨苄青霉素100 mg/mL),制作成含X-Gal、IPTG 和Amp 的平板培养基。高压灭菌后的培养基需冷却至55℃以下时加入X-Gal、IPTG 和Amp,以防失活。

(2)实际上X-gal 和IPTG 可以直接涂抹在平板培养基表面,90mM 的平板,X-gal(20mg/mL)涂40μL,IPTG(50mg/mL)涂16μL。150mm 的平板加倍,待涂布的液体干后即可使用。细菌铺板后,37℃培养过夜,可根据长出菌落的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有DNA插入片段的基因重组体)。

注意事项:

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。





保存条件
-20℃避光密闭保存,一年有效,避免反复冻融
规格
5mL
价格
160.00
货号
CA412